非接觸破碎儀實驗時遇到的常見問題說明

　　探頭振動形成數百萬個微氣泡(空穴)，微氣泡不斷膨脹并發生劇烈爆破。這種稱為空穴現象的現象可以在探頭尖部產生強力的剪切作用，從而引起液體中分子強烈振動。

　　非接觸破碎儀超聲探頭由鈦合金制成，可以作為一個機械變量器來提高由轉換器所產生的振動的振幅。探頭直徑越大，可以處理的樣品量則越多，但是超聲波強度會相應降低。當處理體積更多，粘度更大的樣品，或在高壓條件下工作時，需要使用更大功率的破碎儀。當處理含有機溶劑的樣品或低表面張力的液體時，通常使用一體式探頭，不建議使用探頭尖可更換的探頭。所有探頭均可進行高溫高壓滅菌。

　　非接觸破碎儀試驗時的常見疑問解析：

　　鏈霉菌超聲破碎的方法條件是什么？

　　一般前處理就是配置成一定濃度的菌懸液，使用非接觸破碎儀進行超聲破碎。這時采用的具體條件如下：

　　1.取細菌的24 h培養液于5 000 r/min下離心5 min收集菌體；

　　2.用pH 7．5的Na2HPO-NaH2PO緩沖液洗滌3次，再用該緩沖液將菌體配成1：3的菌懸液．置于40 mL大塑料試管內；

　　3.將大塑料試管置于冰浴中，采用超聲波破碎(功率200 W，1/2”探頭，破碎30 s，間歇30 s)；

　　4.破碎液于12 000 r/min下高速冷凍離心30 min，收集細胞碎片和上清液，超聲破菌流程與上述基本一致，就是洗滌菌體也可以用預冷的生理鹽水或pH8的Tris－HCl，洗滌一次就可以。另外超聲劑量隨樣品量、菌體改變比較大，功率可以到400－600w，超5s，停5s，冰浴，要加終濃度1 mM的PMSF。為確定合適的超聲強度和次數，有必要隨時鏡檢觀察菌體是否*破碎。放線菌屬于原核生物系統進化樹上的(G＋C)摩爾百分含量(mol％)高的革蘭氏陽性菌分枝類群。在做大腸桿菌超聲時，采用的是400W非接觸破碎儀，超5停5的方法效果不錯，但是用在鏈霉菌上似乎沒什么效果，這是因為大腸桿菌式屬于革蘭氏陰性菌的。